一、电转液和电泳液的区别?
电转液(Electrotransfection buffer)和电泳液(Electrophoresis buffer)是在分子生物学和生物化学实验中常用的两种液体。
1. 电转液:电转液是用于电穿孔(Electroporation)实验的缓冲液。电穿孔是一种通过电场作用使细胞膜的通透性增加,从而使外源 DNA 或 RNA 能够进入细胞内的技术。电转液通常包含一定浓度的盐、缓冲剂和其他添加剂,以维持细胞的稳定状态并促进外源核酸的转运。
2. 电泳液:电泳液是用于凝胶电泳(Gel electrophoresis)实验的缓冲液。凝胶电泳是一种常用的分离和分析生物大分子(如 DNA、RNA 和蛋白质)的方法。电泳液通常包含特定浓度的离子盐,以便在电场作用下提供电导性,并使样品在凝胶电泳中迁移。
总的来说,电转液是用于电穿孔实验的缓冲液,而电泳液是用于凝胶电泳实验的缓冲液。它们在实验目的、组成和使用方法上存在明显的区别。
二、电泳液的配制?
电泳液(电泳体系)是一种用于分离和检测生物分子的混合物。其基本组成部分包括培养基、离子化合物、指示剂、电解质、泳材等。以下是电泳液的配制过程:
准备培养基
首先需要准备一种合适的培养基。常见的培养基包括琼脂糖凝胶(琼脂糖是一种含有丰富维生素C和酶的生物材料,常用于培养细胞和微生物)和培养料(用于添加营养物质和离子,如钾、钠、氯等)。
准备离子化合物
离子化合物是一种用于离子交换的化学物质,可以用于调节电泳速度。常用的离子化合物包括氢氧化钾(KOH)、氢氧化钠(NaOH)、硫酸(Shl)、硫酸镁(MSM)等。
准备电解质
电解质是用于调节电泳速度和均匀性的化学物质。常用的电解质包括氯化汞(HgCl2)、氯化银(AgCl)、硫酸锰(MnSO4)等。
准备泳材
泳材是指用于电泳的化学物质。常用的泳材包括琼脂糖凝胶、培养料、离子化合物和电解质。
计算比例
需要计算需要的配置比例,以确保溶液质量、电泳速度和分离效果达到最佳水平。计算时需要考虑到每个成分的质量、密度和溶解度等因素,以确保比例正确。
以上是电泳液的配制过程。需要注意的是,不同厂家和不同品牌的培养基和电解质可能具有不同的成分和质量,需要进行详细的比较和筛选,以确保使用的效果最佳。
三、电泳液是什么?
电泳液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成, 是电泳场中的导体,也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件。
其成分及其离子强度影 响物质的电泳迁移率,应避免与被分离的样 品发生化学反应而改变样品的理化性质或使 其丧失生物活性。
电泳缓冲液中的EDTA 可螯合Mg离子等二价阳离子,防止电泳时激 活DNA酶及Mg离子与核酸生成沉淀。
四、点样的时候错把电转液当成电泳液,有什么影响?
没什么大影响,可能现在你刚学习接触电泳,慢慢的就熟练了,这个问题也就不存在了。
五、等电聚焦电泳原理?
在IFE的电泳中,具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极,pH值逐渐增大。如前所述,蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征,这样在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动,直至某一pH位点时失去电荷而停止移动,此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点(pl)。
同理,位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向阴极移动,直到它们的等电点上聚焦为止。可见在该方法中,等电点是蛋白质组分的特性量度,将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH梯度的凝胶介质中,在电场内经过一定时间后,各组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH位置上,形成分离的蛋白质区带。
六、什么是等电电泳?
等电聚焦电泳(Isoelectric focusing (IEF), also known as electrofocusing)是一种电泳方法,即利用一种特殊的缓冲液(两性电解质)在凝胶(常用聚丙烯酰胺凝胶)内制造一个pH梯度,电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其等电点(pI)的pH处(此时此蛋白质不再带有净的正或负电荷),形成一个很窄的区带。
七、sds电泳染色液是什么?
SDS:十二烷基磺酸钠(Sodium dodecyl sulfate,SDS),是洗洁精的主要成分。常用于DNA提取过程中使蛋白质变性后与DNA分开。SDS是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸-蛋白复合物。在较高温度下,破坏蛋白质与DNA的结合,使DNA释放出来。SDS是一种白色或淡黄色微粘物,工业上常用于洗涤剂和纺织工业。属阴离子表面活性剂。易溶于水,与阴离子、非离子复配伍性好,具有良好的乳化、发泡、渗透、去污和分散性能,广泛用于牙膏、香波、洗发膏、洗发香波、洗衣粉、液洗、化妆品和塑料脱模,润滑以及制药、造纸、建材、化工等行业。
八、阳极液漏到电泳槽会使电泳槽液meq偏高吗?
视工件而定,可能会出现针孔,阳极液PH一般在2-4,流的多的话,局部酸度过低,会造成针孔出现
九、电泳槽液发粘?
防治方法:
(1) 减少尘埃带入量,加强电泳槽液的过滤。所有循环的漆液应全部经过滤装置,推荐用25um精度的过滤袋过滤,加强搅拌防止沉淀,消除槽内的“死角”和裸露金属处,严控PH值和碱性物质,防止树脂析出或凝聚。
(2) 提高后冲洗水的清洁度,电泳后冲洗的水中固体份要尽量低,保持后槽向前槽溢流补充。清洗液要过滤,减少泡沫。
(3) 清理烘干室,清理空气过滤器,检查平衡系统和漏气情况。
(4) 加强磷化后的冲洗、要洗净浮在工件表面上的磷化残渣。检查去离子水循环水洗槽的过滤器是否堵塞,防止被涂物表面的二次污染。
(5) 涂装环境应保持清洁。磷化至电泳槽之间和电泳后沥干(进入烘干室前)应间壁,检查并消除空气的尘埃源。
注:槽液中污物基准测定:取槽液1公斤,用500目的滤网过滤后,残渣量应少于10mg。
十、tbe电泳缓冲液是做什么?tbe电泳缓冲液?
TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离。